高通量蛋白質穩(wěn)定性分析可用于評估大量蛋白質在不同條件下的穩(wěn)定性，其目的在于篩選出穩(wěn)定性高、適合進一步研究和應用的蛋白質候選物，廣泛應用于藥物篩選、成藥性分析、生物技術藥物研發(fā)等領域。
 

　　差示掃描熒光法(DSF)：
 

　　原理：通過檢測當溫度升高或變性劑存在時，蛋白質內源熒光的發(fā)射光譜變化來確定蛋白質的變性轉變溫度(熱轉變溫度Tm值或化學變性Cm值)。
 

　　特點：無需對待測樣品進行標記或使用熒光探針，即可快速測量整塊樣品微孔板，提供高通量數據。
 

　　其他方法：
 

　　生化方法：如圓二色譜(CD)等，用于研究蛋白質的二級結構。
 

　　差示掃描量熱法(DSC)：雖然常被視為蛋白質穩(wěn)定性分析的重要解決方案，但由于對大量樣品的快速分析需求受限，其在藥物篩選和早期開發(fā)中的應用受到一定限制。

 

　　高通量蛋白質穩(wěn)定性分析系統(tǒng)的技術特點：
 

　　高通量：能夠在短時間內獲取盡可能多的信息。
 

　　低成本：使用標準的384孔板，無需特殊耗材以及毛細管，一次成本較低。
 

　　寬溫度掃描范圍：具有10℃~105℃的寬溫度掃描范圍，能夠覆蓋多個蛋白質的結構域。
 

　　高靈敏度：采用高靈敏度的CMOS檢測器，能夠準確檢測熒光變化。
 

　　樣品用量少：樣品用量僅需微量，濃度范圍廣泛，適用于多個階段的穩(wěn)定性分析。
 

　　高通量蛋白質穩(wěn)定性分析系統(tǒng)的應用：
 

　　加速突變體的篩選：通過高通量分析，可以快速篩選出穩(wěn)定性提高或降低的突變體。
 

　　配方和預配方的篩選和優(yōu)化：在藥物研發(fā)中，用于篩選和優(yōu)化藥物的配方。
 

　　蛋白結晶條件篩選：幫助確定適合蛋白質結晶的條件。
 

　　批間一致性評估：確保不同批次生產的蛋白質具有一致的穩(wěn)定性。
 

　　生物相似性評估：在生物技術藥物研發(fā)中，用于評估不同來源或制備方法的蛋白質之間的相似性。
 

　　加速應力和強制降解研究：研究蛋白質在特定條件下的降解情況，為藥物儲存和運輸條件的確定提供依據。